全反式维甲酸对胶质瘤干细胞表型的影响

来源 :中华医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yinhongtao2009
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目的

观察全反式维甲酸(ATRA)对胶质瘤干细胞表型的影响。

方法

首先神经球培养法富集培养原代胶质瘤干细胞(GSC);以ATRA分化培养1周;用流式细胞术对比检测GSC与其分化细胞CD133阳性比例变化;免疫印迹法对比分析干细胞标志物及分化标志物表达水平差异;逆转录聚合酶链式反应检测Notch1活性变化;基于Heochst33342外排法流式侧群细胞比例分析和流式细胞周期检测分析;最后将GSC与其分化细胞分别原位种植鼠脑,对比观察裸鼠存活时间。

结果

神经球培养法有效富集培养原代胶质瘤干细胞球,经ATRA诱导分化1周,细胞呈多突起伸展样贴壁生长;流式细胞术检测示ATRA分化处理降低CD133阳性细胞比例(由平均33.55%降至13.49%,P<0.05);免疫印迹检测示ATRA分化处理降低CD133和Nestin表达水平,而标志物GFAP表达增加(P<0.05);RT-PCR检测示Notch1经ATRA分化后表达明显降低(P<0.05);流式侧群分析示ATRA处理后侧群细胞比例显著降低(由平均0.9%降至0.3%);经ATRA处理后,细胞周期阻滞于G0/G1期;ATAR诱导分化后裸鼠生存时间明显延长(P<0.05)。

结论

ATRA可有效分化GSC,降低GSC干细胞表型,延长裸鼠生存时间,提示ATRA诱导GSC分化在胶质瘤治疗中的可能应用前景。

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