补阳还五汤通过NLRP3/caspase–1调控大鼠髓核细胞退变的机制

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目的 初步探索补阳还五汤对大鼠髓核细胞(nucleus pulposus cell,NPC)退变的抑制效应与Nod样受体蛋白3 (Nod-like receptor protein 3,NLRP3)/胱天蛋白酶-1 (caspase-l)信号通路之间的关系。方法 离体培养大鼠NPC,得到的细胞根据处理方法分为空白组(0.9%氯化钠溶液预处理)、应力拉伸组(应力拉伸刺激+0.9%氯化钠溶液预处理)和补阳还五汤组(应力拉伸刺激+1.0g/L补阳还五汤制剂预处理),采用细胞体外拉伸应力刺激法构建大鼠NPC退变模型。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)和蛋白质印迹法检测3组细胞聚集蛋白聚糖(aggrecan)、NLRP3、caspase-l的mRNA及蛋白表达情况;采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测3组细胞上清液白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-18的表达水平。结果 qRT-PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,应力拉伸组NLRP3、caspase-1的mRNA与蛋白表达较空白组显著上升,aggrecan的mRNA与蛋白表达较空白组显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05);补阳还五汤组NLRP3、caspase-1的mRNA与蛋白表达较应力拉伸组显著下降,aggrecan的mRNA与蛋白表达较应力拉伸组显著上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果显示,应力拉伸组IL-1β、IL-18的表达水平较空白组显著上升,差异均有统计学意义(P<0.05);补阳还五汤组IL-1β、IL-18的表达水平较应力拉伸组显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 补阳还五汤可通过抑制NLRP3/caspase-1信号通路的激活,减轻细胞炎症反应,延缓细胞外基质降解重构,从而发挥防治NPC退变的作用。
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