结核分枝杆菌ESAT-6蛋白免疫优势肽段的重组表达、纯化与鉴定

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目的构建结核分枝杆菌(MTB)ESAT-6免疫优势肽段(ESAT-6P)的基因表达工程菌,以获得大量重组肽段。方法根据编码ESAT-6P的MTB基因序列,设计1对特异引物,通过PCR技术从H37Rv基因组DNA扩增出ESAT-6P编码基因,目的片段克隆到原核表达载体pET-30a中,构建N端带有6His-tag的表达载体。将重组表达载体转化E-coli BL21(DE3)后,经IPTG诱导和SDS—PAGE分析表达产物,斑点免疫结合法(DIBA)鉴定重组肽段的免疫反应性。结果成功诱导表达ESAT-6蛋白的
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