【摘 要】
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目的 建立一种分离效率高、创伤小的毛囊干细胞分离方法,筛选毛囊干细胞体外培养的最优条件,考察毛囊干细胞的体外增殖活性.方法 获取兔胡须部皮肤全层,比较2种不同分离方法
【机 构】
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天津医科大学,天津医院骨科研究所细胞工程室
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目的 建立一种分离效率高、创伤小的毛囊干细胞分离方法,筛选毛囊干细胞体外培养的最优条件,考察毛囊干细胞的体外增殖活性.方法 获取兔胡须部皮肤全层,比较2种不同分离方法获得细胞的贴壁、增殖及克隆形成情况.通过免疫组化的方法检测毛囊干细胞β1整合素、CK19表达情况.选用MTT法和乳酸脱氢酶来间接反映毛囊干细胞的增殖能力.分析细胞周期考察细胞增殖过程中各期细胞的分布.观察血清浓度梯度条件培养液对毛囊干细胞增殖的影响.结果 "两步酶"法的分离能获得大量细胞且细胞迅速贴壁,克隆迅速形成.获取的毛囊干细胞胞浆中有β1整合素、CK19的阳性表达.毛囊干细胞生长曲线及细胞周期都表明毛囊干细胞有高增殖能力.毛囊干细胞增殖表现出血清浓度的依赖.结论 "两步酶"法是一种分离效率高、创伤小的方法,能够获取大量高表达β1整合素、CK19的毛囊干细胞.毛囊干细胞在适当条件下表现为高增殖能力,其生长有一定的血清依赖性.
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