【摘 要】
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目的:研究丹参酮ⅡA诱导人肝癌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的p38MAPK信号转导通路,揭示其抗肝癌的部分机制.方法:4、8、16mg/L丹参酮ⅡA分别作用人肝癌SMMC-7721细胞48h后,免
【机 构】
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上海中医药大学附属普陀医院中医肿瘤科,上海中医药大学诊断教研室,Department of Food Science,Cornell University,
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目的:研究丹参酮ⅡA诱导人肝癌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的p38MAPK信号转导通路,揭示其抗肝癌的部分机制.方法:4、8、16mg/L丹参酮ⅡA分别作用人肝癌SMMC-7721细胞48h后,免疫荧光染色观察细胞凋亡情况;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞特征性DNA条带;流式细胞仪法(Flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡和细胞周期;荧光定量PCR检测Fas和Caspase-3基因mRNA的表达水平;并比较阻断p38MAPK信号通路后丹参酮ⅡA对肝癌细胞凋亡和Fas和Caspase-3基因mRNA的表达.结果:丹参酮ⅡA作用48h后,荧光显微镜下观察到经Hoechst染色的典型凋亡细胞.琼脂糖凝胶电泳可见凋亡细胞DNA呈规律性的梯状条带.4、8、16mg/L浓度丹参酮ⅡA作用人肝癌细胞后的细胞凋亡率分别为12.83%±1.51%,17.86%±2.70%和29.24%±7.58%,与对照组6.30%±2.08%比较均有显著性差异(P<0.01);阻断p38MAPK信号通路后,凋亡率和G0/G1期细胞比例明显降低(P<0.01).8mg/L丹参酮ⅡA作用人肝癌细胞48h后FasmRNA和Caspase-3mRNA的表达明显上升;阻断p38MAPK信号通路后,丹参酮ⅡA作用人肝癌细胞的FasmRNA和Caspase-3mRNA的表达明显下降.结论:丹参酮ⅡA能诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡,阻滞肝癌细胞于G0/G1期.通过p38MAPK信号转导通路上调Fas、Caspase-3mRNA的表达可能是其诱导肝癌细胞凋亡的重要机制.
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