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根据NCBI(GenBankAccessionNo.:D83732.1)中注册的米曲霉内切葡聚糖酶&馏基因序列设计引物,以本实验室自行筛选的天然米曲霉基因组DNA为模板,PCR高保真扩增出内切葡聚糖酶基因eg,将其定向插入到酵母表达载体pPICZαA上,转化酵母宿主菌X33,刚果红水解圈筛选结果表明已成功表达。SDS-PAGE分析表明,表达产物分子量约为65ku。对酵母表达工程菌X33一eg进行发酵条件优化,结果显示最适甲醇诱导浓度为0.75%,用1L三角瓶诱导培养5天达到最高酶活120U/mL。对重组酶