【摘 要】
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谷氨酸脱氢酶是生物体内最主要的氧化脱氨基酶类,为了进一步研究其功能,我们以大肠杆菌DH5α菌株基因组DNA为模板和相应的寡聚脱氧核苷酸为引物,进行PCR扩增大肠杆菌NADP特异
【基金项目】
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国家自然科学基金，北京市科技新星计划项目
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谷氨酸脱氢酶是生物体内最主要的氧化脱氨基酶类,为了进一步研究其功能,我们以大肠杆菌DH5α菌株基因组DNA为模板和相应的寡聚脱氧核苷酸为引物,进行PCR扩增大肠杆菌NADP特异性谷氨酸脱氢酶基因(NADP-specific glutamate dehydrogenase,gdhA gene),将所得DNA片断连接到质粒pUC18上,转化大肠杆菌DH5α,进行蓝白筛选和酶切鉴定,经测序证明序列正确无误后将gdhA基因连接到表达载体pTrcHisC上,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,经SDS-PAGE和双
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