【摘 要】
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为研究脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对牛卵泡颗粒细胞凋亡的影响.首先利用CCK8检测了不同浓度(0,10,50,100,200 ng/mL)的BDNF处理牛卵泡颗粒
【机 构】
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吉林大学动物科学学院,长春,130062
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为研究脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对牛卵泡颗粒细胞凋亡的影响.首先利用CCK8检测了不同浓度(0,10,50,100,200 ng/mL)的BDNF处理牛卵泡颗粒细胞24 h之后细胞活性变化情况,发现50,100,200 ng/mL的BDNF都能够极显著的增加颗粒细胞的活性(P<0.01).以100 ng/mL作为BDNF最适处理浓度,利用流式细胞仪,通过线粒体膜电位检测(JC-1)发现,BDNF组的红绿荧光相对比例极显著的升高(P<0.01).接着利用实时荧光定量PCR方法,发现BDNF导致P53、Bax和Caspase-3的mR-NA表达水平极显著降低(P0.05).最后通过siRNA干扰内源性的BDNF的合成(P<0.01),利用实时荧光定量PCR方法发现,干扰BDNF之后,P53极显著的升高(P<0.01),Bax显著升高(P0.05).结果表明:BDNF对牛卵泡颗粒细胞的凋亡有抑制作用,为牛卵泡的发育和颗粒细胞功能的研究提供了新的途径.
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