C3’5’H对植物蓝色花形成具有重要影响作用。为揭示HmC3’5’H对绣球花‘无尽夏’（Hydrangea macrophylla， ‘Forever Summer’）蓝色不孕花花色形成的影响，本研究从绣球花‘无尽夏’盛花期不孕花中克隆获得的HmC3’5’H的ORF序列，该序列长度为1 524 bp，编码507个氨基酸，HmC3’5’H蛋白属于CYP75家族、P450超家族成员。系统进化树显示，HmC3’5’H蛋白与仙客来（Cyclamen persicum）、葡萄（Vitis vinifera）的同源蛋白之间的亲缘关系最近。qRT-PCR分析结果显示HmC3’5’H的表达具有组织特异性，在不孕花中的相对表达量最高，并且其相对表达量随花色着色趋势一致。相关性分析显示，HmC3’5’H的表达量与花青素积累趋势一致，呈极显著正相关，相关性系数高达0.995，另外，HmC3’5’H的表达量与花青素合成关键基因HmF3H、HmCYP75B1、HmDFR、HmANS都呈现极显著正相关。本研究结果为揭示HmC3’5’H调控绣球花不孕花花色形成机制提供依据。