评价糖原合酶激酶3β(GSK-3β)磷酸化与高糖因素取消七氟烷后处理心肌细胞保护作用的关系。
方法取H9c2大鼠心肌细胞分别培养于正常浓度葡萄糖(5.56 mmol/L)或高浓度葡萄糖(33 mmol/L)的DMEM培养基中。采用随机数字表法分为8组(n＝24)：正常对照组(NC组)、正常糖浓度缺氧复氧组(NH/R组)、正常糖浓度七氟烷后处理组(NS组)、正常糖浓度GSK-3β抑制剂SB216763组(NSB组)、高糖培养组(HC组)、高糖缺氧复氧组(HH/R组)、高糖七氟烷后处理组(HS组)和高糖GSK-3β抑制剂SB216763组(HSB组)。采用缺氧3 h复氧的方法制备心肌细胞缺氧复氧模型。NS组和HS组复氧即刻将心肌细胞暴露于2.4%七氟烷30 min，NSB组和HSB组复氧开始前加入GSK-3β抑制剂SB216763，终浓度10 μmol/L。于复氧3 h时采用Anexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率，Western blot法检测GSK-3β和磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)的表达，黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性，比色法测定LDH活性和MDA含量。
结果与NC组比较，NH/R组和HC组细胞凋亡率、LDH活性及MDA含量升高，SOD活性降低，NH/R组GSK-3β表达上调，p-GSK-3β表达下调，NS组p-GSK-3β表达上调，HC组p-GSK-3β表达下调(P<0.05)；与NH/R组比较，NS组和NSB组细胞凋亡率、LDH活性及MDA含量降低，SOD活性升高，NS组GSK-3β表达下调，p-GSK-3β表达上调(P<0.05)；与HC组比较，HH/R组细胞凋亡率、LDH活性及MDA含量升高，SOD活性降低，GSK-3β表达上调，p-GSK-3β表达下调(P<0.05)；与HH/R组比较，HSB组细胞凋亡率、LDH活性及MDA含量降低，SOD活性升高(P<0.05)。
结论高糖因素取消七氟烷后处理心肌细胞保护作用的机制与抑制GSK-3β磷酸化有关。