【摘 要】
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目的:构建结核分枝杆菌(MTb)esat6基因原核表达载体并进行表达.方法:PCR扩增MTb esat6基因,克隆人pQE30质粒,测序正确后,再亚克隆入pET32a(+)质粒,构建pQE30-ESAT6和pET32a(+
【机 构】
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重庆医科大学基础医学院微生物学教研室
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目的:构建结核分枝杆菌(MTb)esat6基因原核表达载体并进行表达.方法:PCR扩增MTb esat6基因,克隆人pQE30质粒,测序正确后,再亚克隆入pET32a(+)质粒,构建pQE30-ESAT6和pET32a(+)-ESAT6重组体.结果:重组体分别转化DH5a和BL21(DE3)菌后,经IPTG诱导,pQE30-ESAT6未表达目的蛋白,而pET32a(+)-ESAT6表达出19kDa 左右重组蛋白.SDS-PAGE分析显示,IPTG诱导4h重组蛋白表达量最高,表达蛋白以可溶性非包涵体形式存在
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