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目的
研究SFTS病毒(SFTS virus, SFTSV)的非结构蛋白(Nonstructural proteins, NSs)重组质粒的体液免疫原性。
方法利用聚合酶链反应法(Polymerase chain reaction, PCR)构建真核表达质粒pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-NSs-Flag；引入NheⅠ酶切位点及tPA(Tissue plasminogen activator, tPA)信号肽，构建质粒pJW4303-tPA-NSs-opt。将质粒转染至HEK 293T细胞，蛋白质印迹法(Western blot, WB)验证NSs表达。NSs相关质粒免疫BALB/c小鼠，采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测SFTSV NSs特异性IgG抗体。
结果成功构建了重组NSs质粒，WB验证了NSs可在HEK293T细胞内表达。pJW4303-NSs、pJW4303-NSs-opt、pJW4303-tPA-NSs-opt重组质粒均可诱导小鼠体内产生特异性IgG，其中单优化型质粒pJW4303-NSs-opt的免疫原性较好，在第6、8周的IgG水平显著高于野生型NSs质粒，差异具有统计学意义。
结论本研究构建的SFTSV的NSs重组优化型质粒具有良好体液免疫原性，其中单优化型效果最佳。