【摘 要】
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背景氧化应激水平过高、长期的炎症状态严重影响糖尿病患者的伤口愈合，目前治疗糖尿病皮肤溃疡（DCU）的药物有生物制剂、中药、干细胞疗法等，但由于其缺乏安全性、有效性的充足证据，在临床应用中受到限制，亟需发现新的药物。透明质酸寡糖（o-HA）具有抗氧化性和抗炎性，是治疗DCU的重要策略。目的 观察o-HA对DCU创面愈合作用并探究其对氧化应激核因子E2相关因子2（Nrf2）信号通路的影响。方法 实验时
【基金项目】
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国家重点研发计划（2021YFC2103100）——医用多糖生物制造关键技术及产业化示范； 山东省重点研发计划（重大科技创新工程）项目（2021ZDSYS07）——“医药绿色智能制造与新药评价关键技术研究”； 济南市“高校20条”资助项目“天然产物新功能发现及生物合成创新团队”（2019GXRC038）；
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背景氧化应激水平过高、长期的炎症状态严重影响糖尿病患者的伤口愈合，目前治疗糖尿病皮肤溃疡（DCU）的药物有生物制剂、中药、干细胞疗法等，但由于其缺乏安全性、有效性的充足证据，在临床应用中受到限制，亟需发现新的药物。透明质酸寡糖（o-HA）具有抗氧化性和抗炎性，是治疗DCU的重要策略。目的 观察o-HA对DCU创面愈合作用并探究其对氧化应激核因子E2相关因子2（Nrf2）信号通路的影响。方法 实验时间为2021年4—12月，取6周龄SPF级雄性昆明小鼠90只，留取10只作为正常对照组（NC组），其余经腹腔注射链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病小鼠模型，建模成功的60只糖尿病小鼠按照随机数字表法分为6组，每组10只，即糖尿病模型组（DM组）、重组人表皮生长因子阳性对照组（rhEGF组）、空白基质阴性对照组（matrix组）、低剂量o-HA治疗组（0.5%o-HA组）、中剂量o-HA治疗组（1%o-HA组）、高剂量o-HA治疗组（2%o-HA组）。所有小鼠利用全层皮肤切除环形夹板法建立DCU模型，NC组和DM组小鼠创面不做任何处理，其他各组每日创面及创周常规消毒后，均匀涂抹各组相应药物于创面及创周，rhEGF组给药1次/d,0.5%、1%、2%o-HA组给药2次/d，连续给药14 d。治疗后第1、7、14天拍照记录DCU小鼠创面愈合情况，利用HE染色、Masson染色、CD34免疫组化染色观察给药14 d后DCU小鼠创面肉芽组织形态变化、胶原纤维生成和新生血管，试剂盒检测给药14 d后DCU小鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平，Western-blotting检测给药14 d后DCU小鼠创面组织核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）、NAD（P）H醌氧化还原酶1（NQO1）的蛋白表达水平。结果 给药第7天，rhEGF组、1%o-HA组创面愈合率高于DM组，0.5%o-HA组、2%o-HA组创面愈合率低于NC组、高于DM组；给药第14天，rhEGF组、0.5%o-HA组、1%o-HA组、2%o-HA组创面愈合率高于DM组（P<0.05）。组织形态学显示o-HA软膏干预后创面肉芽组织、胶原纤维、新生血管密度明显增多。rhEGF组、0.5%o-HA组、1%o-HA组、2%o-HA组MDA水平低于DM组，SOD水平高于DM组；0.5%o-HA组、2%o-HA组MDA水平高于NC组（P<0.05）。rhEGF组、1%o-HA组Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达水平均高于NC组和DM组；0.5%o-HA组Nrf2、NQO1蛋白表达水平高于DM组，HO-1蛋白表达水平高于NC组和DM组；2%o-HA组HO-1蛋白表达水平高于NC组和DM组，NQO1蛋白表达水平高于DM组（P<0.05）。结论 o-HA对DCU小鼠创面有潜在促愈合作用，以1%o-HA软膏愈合效果最好，可加速伤口闭合、再上皮化，促进血管新生，影响Nrf2途径，加速创面愈合，具有安全性高、稳定性好的优势，在临床DCU创面修复方面极具潜力。
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