【摘 要】
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应用噬菌体表面呈现技术,从腮腺炎病毒抗体阳性者淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增出抗体重链Fd和轻链基因,经XhoI/5peI、SacI/XbaI双酶切,先后克隆入噬粒载体pComb3中,再电
【机 构】
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深圳市南山区疾病预防控制中心,中山大学
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应用噬菌体表面呈现技术,从腮腺炎病毒抗体阳性者淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增出抗体重链Fd和轻链基因,经XhoI/5peI、SacI/XbaI双酶切,先后克隆入噬粒载体pComb3中,再电转化大肠杆菌XL1-blue,以辅助.噬菌体VCSM13进行超感染.从分离出的淋巴细胞中共提取高质量RNA约110μg,经逆转录、PCR,分别扩增出约700 bp大小的κ、λ和Fd基因.PCR产物和载体经纯化、双酶切后进行连接,在2.5 kV、200Ω、25μF的条件下电转化,转化率为2.48×10
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