RNA干扰选择性下调心肌成纤维细胞结缔组织生长因子

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目的研究RNA干扰技术能否选择性下调乳鼠心肌成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)及其诱导的下游纤维化成分的表达。方法利用差速贴壁法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞。用携带U6启动子和CTGF特异性短发夹RNA(shRNA)编码序列的质粒载体CTGF-shRNA,及含非特异性shRNA编码序列的对照质粒CTGF-con以lipofectamine ^TM2000为载体转染原代培养的乳鼠心肌成纤维细胞。加入含G418的DMEM培养液培养一月筛选后获得稳定转染的细胞。通过半定量RT-PCR检测细胞内转化生长因子(T
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