目的 了解贵州省人民医院2019年6月至2021年6月无菌体液标本中耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）携带碳青霉烯酶情况及同源性，为该院院感防控及临床合理用药提供参考依据。方法 收集该院2019年6月至2021年6月门诊及住院患者无菌体液标本中分离到的CRE,采用BD phoenix-100或VITEK-2全自动细菌鉴定药敏仪进行细菌鉴定及药敏试验，K-B法或E-test法进行药敏结果复核。采用碳青霉烯抑制剂增强试验检测CRE产碳青霉烯酶表型，采用胶体金免疫层析法检测CRE携带的碳青霉烯酶类型，脉冲场凝胶电泳（PFGE）对肺炎克雷伯菌进行同源性分析。结果 在无菌体液标本中收集的CRE菌株共111株；CRE检出率处于前3位的分别是肺炎克雷伯菌[82.0%（91/111）]、大肠埃希菌[10.8%（12/111）]、产酸克雷伯菌[3.6%（4/111）];CRE来源的无菌体液标本类型以血液标本[55.9%（62/111）]为主，其次为腹水[25.2%（28/111）]、胸腔积液[8.1%（9/111）];CRE检出率处于前3位的科室分别为肝胆外科[40.5%（45/111）]、重症监护病房[21.6%（24/111）]、血液内科[9.0%（10/111）]。碳青霉烯抑制剂增强试验检测碳青霉烯酶表型，结果显示，94株（84.7%）CRE携带丝氨酸酶，14株（12.6%）携带金属酶，同时产丝氨酸酶和金属酶的有2株，既不产丝氨酸酶也不产金属酶有1株；胶体金免疫层析法检测结果显示，108株（97.0%）携带碳青霉烯酶，其中94株（84.7%）携带KPC,13株（11.7%）携带NDM,1株携带IMP酶，1株同时携带IMP和NDM,未检测出OXA-48、VIM型碳青霉烯酶，肺炎克雷伯菌主要携带KPC（96.7%）,大肠埃希菌主要携带NDM（83.4%）。PFGE检测肺炎克雷伯菌同源性，结果显示，91株肺炎克雷伯菌可分为A～O 15个型，其中A型菌株最多，B型次之。结论 该院感染的CRE以肺炎克雷伯菌为主，主要携带KPC。CRE对临床常用抗菌药物普遍有较高的耐药率，肺炎克雷伯菌的同源性较高，医院应该加强院感防控，预防及减少CRE的产生。