【摘 要】
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目的探讨改良、简化肝细胞的灌注、分离方法,以提高细胞产量,降低制作成本.方法分离、结扎肝上下腔静脉,游离肝下下腔静脉,乙二醇双四乙酸(EGTA)门静脉原位灌注,剪开肝下下腔
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目的探讨改良、简化肝细胞的灌注、分离方法,以提高细胞产量,降低制作成本.方法分离、结扎肝上下腔静脉,游离肝下下腔静脉,乙二醇双四乙酸(EGTA)门静脉原位灌注,剪开肝下下腔静脉,离体;1640液内剪碎、0.05% Ⅳ型胶原酶37 ℃水浴恒温消化、纯化后37 ℃ 5% CO2培养箱内孵育培养,观察产量和细胞功能.结果改良的分离方法所获得的肝细胞占细胞总数的95%以上,肝细胞的获取量及纯度同传统方法相比,简化了二步灌注的步骤和所需仪器,极大减少了胶原酶的使用量.结论改良的分离、培养方法经济、高效,可完全保证肝细胞的产量和纯度.
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