【摘 要】
：
目的 检测食管胃结合部腺癌(AEG)患者基因突变情况,分析内披蛋白(IVL)突变对肿瘤细胞生物学功能的影响.方法 将22例山西地区食管胃结合部腺癌患者的癌组织和癌旁组织进行全外显子组测序,分析IVL的突变情况并筛选IVL突变位点;整理汇总TCGA数据库中食管癌IVL的突变情况,进行GO功能注释和KEGG富集分析.构建IVL过表达质粒,转染食管癌细胞系KYSE150,测定细胞的增殖和迁移能力.体外合成不同突变位点的IVL寡肽,通过体外活性测试分析寡肽与转谷氨酰胺酶1(TGase1)的结合能力.结果 测序结果
【机 构】
：
山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西 太原030001;山西医科大学药理学教研室,山西 太原030001;山西医科大学生物化学与分子生物学教研室,山西 太原030001;山西医科大学细胞生理学
论文部分内容阅读
目的 检测食管胃结合部腺癌(AEG)患者基因突变情况,分析内披蛋白(IVL)突变对肿瘤细胞生物学功能的影响.方法 将22例山西地区食管胃结合部腺癌患者的癌组织和癌旁组织进行全外显子组测序,分析IVL的突变情况并筛选IVL突变位点;整理汇总TCGA数据库中食管癌IVL的突变情况,进行GO功能注释和KEGG富集分析.构建IVL过表达质粒,转染食管癌细胞系KYSE150,测定细胞的增殖和迁移能力.体外合成不同突变位点的IVL寡肽,通过体外活性测试分析寡肽与转谷氨酰胺酶1(TGase1)的结合能力.结果 测序结果发现在食管胃结合部腺癌中IVL有5处突变;GO分析显示IVL突变与上皮细胞分化、细胞分化调控的活性等生物学过程有关;KEGG信号通路分析显示IVL突变与cAMP信号通路等途径有关.过表达IVL可抑制食管癌细胞的增殖和迁移能力(P<0.05).突变型IVL寡肽与TGase1的结合能力弱于野生型寡肽(P<0.05).结论 IVL重复基序第7位氨基酸的突变减弱IVL与TGase1的结合,影响多种与肿瘤相关的生物学过程和信号通路.
其他文献
总结1例垂体瘤术后并发颅内感染合并中毒性表皮坏死松解症患者的护理.颅内感染需多种抗生素联合治疗,复杂的药物治疗容易引起药物不良反应,增加治疗及护理的难度,责任护士针对患者的主要护理问题,从病房消毒隔离管理、气道管理、皮肤护理、体液管理、营养支持等5个方面,经过55 d的精心护理,患者意识清楚,痰液及脑脊液培养均转为阴性,全身松解表皮已结痂愈合,四肢功能恢复,好转出院.
目的 研究放射治疗对宫颈癌组织基因表达的影响,探讨差异表达基因对放射治疗敏感及在抗拒中的作用.方法 患者接受相同的放疗模式:全盆腔外照射总剂量45戈瑞(Gy),共25次(45 Gy/25 f),腔内近距离内照射每次剂量5～6 Gy,共治疗5～6次.分别在近距离放射治疗前、近距离放射治疗中、近距离放射治疗结束时留取标本.高通量分析近距离照射前,照射中和照射后基因表达的情况;real-time PCR及Western blot验证与放射敏感和耐受相关的基因.结果 生物信息学显示DNA损伤基因表达增加(P<0.
目的 探讨两种压力固定技术对原矛头蝮蛇咬伤后患肢肿胀的影响,为临床工作者更准确地应用压力固定技术提供参考.方法 2019年3月至2020年12月,采用便利抽样选取某三级甲等医院急诊外科收治的原矛头蝮蛇咬伤患者95例为研究对象,按住院号单双号将其分为对照组(n=46)和观察组(n=49).在急诊预检分诊处,对照组给予常规压力绷带固定,而观察组给予压力垫固定.两组患者均采用常规治疗与护理方案.比较两组患者入院时、固定后24 h患肢肿胀情况、疼痛及舒适度评分.结果 两组患者入院时患肢肿胀情况(范围、程度)、疼痛
总结1例皮-罗序列征新生儿早期经口喂养护理与指导要点.建立多学科团队,制定护理干预措施,包括:选择侧卧结合45°俯卧位以保持呼吸道通畅;实施促进喂养技术结合口腔运动进行综合干预;根据吸吮情况及奶量选择滴管喂养及唇腭裂婴儿专用特需喂哺瓶;严格管理新生儿摄入量等.该例新生儿于出生后3d开始经口喂养,于第6天出院.3个月回访,实现纯母乳喂养,随访结果满意.
目的 鉴定上皮性卵巢癌细胞侧群细胞(SP细胞)肿瘤干细胞样细胞生物学特性,并检测侧群细胞内差异蛋白质的表达.方法 流式分选上皮性卵巢癌细胞系SKOV3和A2780具有外泌Hochest33342染料生物学特性的侧群细胞,鉴定其肿瘤干细胞样细胞相关生物学特性.运用细胞培养稳定同位素标记(SILAC)的定量蛋白质组学技术,检测SP细胞中差异表达膜蛋白.结果 运用流式分选技术,成功分选出上皮性卵巢癌细胞系SKOV3和A2780细胞占比0.5％的SP细胞,经过多次分选,SP细胞比例逐步升高,并能够逐步分化成非SP
目的 探究RNA结合蛋白多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)在人胚胎干细胞(hESC)多能性维持中的生物学功能,探索其调控hESC多能性的新机制.方法 在hESC中敲低PCBP1蛋白进行克隆形成能力检测及碱性磷酸酶染色实验;qPCR检测多能性/分化标志基因的表达变化;同时分离hESC细胞核与细胞质进行RNA测序;对PCBP1蛋白敲低产生的RNA核质变化进行多层次分析.结果 PCBP1蛋白敲低后显著抑制了人胚胎干细胞的克隆形成能力(P<0.01)并导致多能性相关基因RNA水平降低(P<0.01),细胞分化相关
目的 探究2型糖尿病血管钙化中基质囊泡(MVBs)的变化及MVBs、白介素-1β(IL-1β)在糖尿病血管钙化中的作用.方法 建立2型糖尿病大鼠钙化模型和体外细胞高糖钙化模型;用PET/CT成像、Von Kossa染色或茜素红染色检测钙的沉积;免疫荧光染色、实时定量PCR或Western blot检测骨形态发生蛋白2(BMP-2)、核心结合因子2(RUNX 2)、MVBs标志物annexin-Ⅵ及IL-1β的表达.结果 与对照组相比,2型糖尿病大鼠主动脉或高糖钙化细胞中有明显钙沉积,且BMP-2、RUNX
目的 探讨lncRNA DNM3OS对直肠癌SW-480细胞的增殖、凋亡以及放射敏感性的影响及分子机制.方法 选取30例直肠癌患者癌组织及癌旁组织,RT-qPCR检测DNM3OS和miR-193a-3p的表达水平;将抑制DNM3OS的表达载体、过表达miR-193a-3p载体转染至SW-480细胞,将DNM3OS与抑制miR-193a-3p的表达载体共转染至SW-480细胞,并用4 Gy射线照射;细胞集落形成实验检测细胞放射敏感性;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测SW-480细胞增殖抑制率;流式细胞测量
目的 探讨干扰去整合素-金属蛋白酶17(ADAM17)对人宫颈癌细胞系HeLa细胞增殖的影响,并对其作用机制进行初步探索.方法 在HeLa细胞中转染ADAM17干扰质粒,荧光定量PCR和Western blot验证转染效率;CCK-8法检测细胞增殖,划痕实验和Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭;Western blot检测ADAM17、PCNA、EGFR、p-EGFR、ERK和p-ERK蛋白表达.结果 转染后HeLa细胞中ADAM17表达被抑制(P<0.05);干扰ADAM17不影响宫颈癌细胞迁移
目的 探讨二氢杨梅素(DHM)对实验性结肠炎小鼠的作用及其对调节性B细胞(Breg)的影响.方法 将小鼠随机分为正常组、DSS(葡聚糖硫酸钠)组、DSS+DHM组、DSS+mesalazine组(造模采用4％DSS连续饮用7 d).7 d后,每天分别给予灌胃水(0.2 mL/d)、DHM(40 mg/kg·d)和美沙拉嗪(520 mg/kg·d),连续灌胃7 d,记录小鼠每天疾病活动性指数(DAI),第14天脱颈处死小鼠,记录结肠长度,结肠组织切片行HE染色;流式细胞测量术检测脾脏单细胞悬液中CD19+B