【摘 要】
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采用电融合方法,探讨不同来源的供体细胞对水牛核移植效果的影响.体外成熟培养22～24 h的水牛卵母细胞,在含有5 μg/mL细胞松弛素B的操作液中进行去核,然后将经0.1μg/mL Aphid
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采用电融合方法,探讨不同来源的供体细胞对水牛核移植效果的影响.体外成熟培养22～24 h的水牛卵母细胞,在含有5 μg/mL细胞松弛素B的操作液中进行去核,然后将经0.1μg/mL Aphidicolin (APD)+0.5%FBS培养2～9 d的水牛不同来源的供体细胞,注射到去核的卵母细胞卵周隙中,电融合形成重构胚.重构胚经5 μmol/L离子霉素激活处理5 min,并在2 mmol/L的6-DMAP中培养3 h后,在含有颗粒细胞单层细胞的微滴中培养7～9 d,观察其卵裂和胚胎发育情况.结果发现,来自水牛胎儿耳部或腹部组织块的成纤维细胞用作供体细胞,其重组胚的融合率及体外发育能力差异不显著(P>0.05),且细胞培养方法(组织块法或酶消化法)对其核移植效果没有影响;来自编号011010的胎儿耳皮成纤维细胞重组胚的囊胚发育率显著高于来自编号030323和030410细胞 (31.45% vs 10.96%和14.49%,P0.05).以上结果表明:经不同培养方法培养的细胞或来自身体不同部位的组织的成纤维细胞均可作为核移植研究的供体细胞,但是水牛体细胞核移植效果受供体的个体差异的影响.
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