【摘 要】
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H3K9的异常甲基化被认为是影响胚胎发育障碍的主要表观遗传修饰之一. 毛壳素是 H3K9me3的特异性抑制剂,能抑制其甲基转移酶SUV39H1/2和G9A的活性,下调 H3K9me3水平.本实验通过在猪卵母细胞体外成熟过程中添加毛壳素, 探究调控 H3K9me3对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响. 在0～22h用不同浓度毛壳素(0nmol/L,2nmol/L,5nmol/L,10nmol/L)处理猪卵母细胞, 与未处理组相比, 发现 2nmol/L毛壳素可显著提高卵母细胞的第一极体排出率(81.5%
【机 构】
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广西大学 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁 530004
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H3K9的异常甲基化被认为是影响胚胎发育障碍的主要表观遗传修饰之一. 毛壳素是 H3K9me3的特异性抑制剂,能抑制其甲基转移酶SUV39H1/2和G9A的活性,下调 H3K9me3水平.本实验通过在猪卵母细胞体外成熟过程中添加毛壳素, 探究调控 H3K9me3对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响. 在0～22h用不同浓度毛壳素(0nmol/L,2nmol/L,5nmol/L,10nmol/L)处理猪卵母细胞, 与未处理组相比, 发现 2nmol/L毛壳素可显著提高卵母细胞的第一极体排出率(81.5% VS 72.62%), 孤雌胚胎 4-细胞率(74.43% VS 68.69%)和囊胚率(40.43% VS 27.48%)(p<0.05). qRT-PCR结果表明, 与未处理组相比, 2nmol/L 毛壳素显著降低卵母细胞中SUV39H 1/2和G 9A的表达,显著提高囊胚中Nanog ,Oct 4,CDX 2的表达(p<0.05).免疫荧光分析发现,与未处理组相比, 2nmol/L毛壳素显著降低囊胚中 H3K9me3的表达(p0.05). 5nmol/L处理组的第一极体排出率显著提高(87.39% VS 71.95%, p<0.05). 以上结果表明, 毛壳素可通过降低卵母细胞中 SUV39H 1/2和 G 9A 的表达,上调囊胚中多能性基因 Nanog ,Oct 4,CDX 2的表达,调控H3K9me3的水平, 从而促进猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育.
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