【摘 要】
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八爪金龙属紫金牛科(Myrsinaceae)紫金牛属(Ardisia)植物,是常用民族药,其抗病毒、抗心律失常、抗肿瘤的效果显著.八爪金龙的基原植物表型极度相似,导致其应用混乱.本研究筛
【机 构】
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贵州中医药大学药学院,药食两用资源应用与开发研究中心,中药材开发技术研究中心,贵阳,550025;贵州大学,贵州省药食同源植物资源开发工程技术研究中心,贵阳,550025
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八爪金龙属紫金牛科(Myrsinaceae)紫金牛属(Ardisia)植物,是常用民族药,其抗病毒、抗心律失常、抗肿瘤的效果显著.八爪金龙的基原植物表型极度相似,导致其应用混乱.本研究筛选适用于八爪金龙基原植物鉴定的DNA条形码序列,以探索高效准确鉴定八爪金龙基原植物的新方法.提取了百两金、朱砂根和红凉伞的植物基因组DNA,利用DNA条形码序列(ITS,ITS2,RbcL,PsbA-trnH)对其进行PCR扩增和测序,比较各序列的扩增率和测序率,应用Blast方法来评估各序列的鉴定效率.同时与9种紫金牛属植物的相应序列进行比对,构建NJ树.结果表明:ITS、ITS2、RbcL序列的扩增成功率和测序成功率均为100％,PsbA-trnH序列的扩增成功率和测序成功率分别为97.7％和96.7％.4个候选序列的BLAST成功率结果:ITS=ITS2(100％)＞PsbA-trnH(99.2％)＞RbcL(33.3％).ITS序列的平均种间遗传距离大于平均种内遗传距离.系统发育树构建结果显示,ITS2序列的NJ树可将百两金、朱砂根和红凉伞单聚成一支,与同属植物区别开;PsbA-tmH片段将朱砂根、红凉伞单聚为一支,区别于其他同属植物;ITS序列能将不同基原聚成不同的分支,区别于同属植物,但朱砂根和红凉伞需进一步研究.各结果显示ITS序列较其他序列有明显优势,本研究建立了基于ITS序列的八爪金龙基原的DNA条形码鉴定技术方法,为临床准确用药提供依据.
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