腺苷对哮喘患者外周血单个核细胞产生白三烯C4的影响

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为探讨腺苷作为炎症介质对哮喘炎症细胞、炎症介质及细胞因子网络的影响,我们研究了腺苷对哮喘患者外周血单个核细胞(PBMCs)产生白三烯(LT)C4的影响。 对象与方法哮喘组:10例,男、女各5例,年龄(33±16)岁,病程(7±5)年。均来自北京协和医院呼吸内科门诊,诊断符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组的诊断标准[1],除外伴发其他肺部疾病,至少1个月内未用过糖皮质激素类药物,2~4周内未用过茶碱类药物。正常对照组:8例,男、女各4例,年龄(39±12)岁。均为健康体检者,无吸烟史及过敏性疾病史。 采用Pharmacia CAP 系统测定哮喘患者血清Phadiatop、总免疫球蛋白(TIg)E水平。测定一秒钟用力呼气容积占预计值的百分率(FEV1占预计值%)作为气道阻塞程度的指标。 取空腹静脉血 10 ml,肝素抗凝,经淋巴细胞分离液分离获得PBMCs,以1×106个/孔加入24孔培养板。分空白组(加空白培养液)、腺苷组(加腺苷至终浓度10-4mol/L),在37℃、5% CO2条件下培养18 h,收集上清液。加无水乙醇提取、高压液相色谱(HPLC)分离LTC4,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定LTC4水平。按美国Amersham公司提供的操作程序进行,每份样本均做复孔。

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