【摘 要】
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目的应用小干扰RNA（siRNA）干扰人急性髓系白血病细胞株KG-1细胞SUV39H1(suppressor of variegation 3-9 homolog 1）基因的表达，研究SUV39H1基因沉默对KG-1细胞增殖、抑癌基因P15表达及组蛋白甲基化、乙酰化修饰的影响，探寻白血病基因治疗的新靶点。方法用LipofectamineTM2000将体外合成针对SUV39H1基因的siRNA片段
【机 构】
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目的应用小干扰RNA（siRNA）干扰人急性髓系白血病细胞株KG-1细胞SUV39H1(suppressor of variegation 3-9 homolog 1）基因的表达，研究SUV39H1基因沉默对KG-1细胞增殖、抑癌基因P15表达及组蛋白甲基化、乙酰化修饰的影响，探寻白血病基因治疗的新靶点。
方法用LipofectamineTM2000将体外合成针对SUV39H1基因的siRNA片段转染到KG-1细胞后，采用RT-PCR方法检测siRNA对SUV39H1 mRNA表达的抑制效果，用四唑氮化合物（MTS）法绘制细胞增殖抑制曲线，Western blot法检测目的基因SUV39H1和抑癌基因p15的表达及对组蛋白甲基化、乙酰化修饰的影响。
结果SUV39H1 siRNA转染KG-1细胞可沉默该基因；沉默SUV39 H 1基因表达可抑制细胞增殖，30、60、120、240 nmol/L SUV39H1 siRNA转染48 h后，KG-1细胞的增殖抑制率分别为（23 . 57 ± 1.98）%、（48.69 ± 1.84）%、（62.69 ± 1.61）%、(81.06 ± 3.22）%，差异有统计学意义（P<0.05)；沉默SUV39H1基因可上调p15基因的表达，下调组蛋白H3 K9三甲基化，上调组蛋白H3K9、H3的乙酰化。30、60、120 nmol/L SUV39H1 siRNA处理KG-1细胞48 h后，组蛋白H3 K9三甲基化水平较对照组分别减少25%、33%、49%；组蛋白H3 K9乙酰化水平增强，分别为对照组的1.83、2.16、3.07倍；组蛋白H3乙酰化水平逐渐升高为对照组的1.35、1.87、2.37倍；p15表达水平呈递增趋势，分别为对照组的1.52、2.89、3.08倍；而组蛋白H4、 H3K14、H3K27的乙酰化水平未见显著变化。
结论沉默SUV39H1基因表达可能通过改变抑癌基因启动子区域的组蛋白修饰，即上调组蛋白H3 K9乙酰化及下调H3K9甲基化，使p15基因重新表达，从而抑制细胞增殖。
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