重组腺相关病毒介导的nm23H1载体的构建及鉴定

来源 :华中科技大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:huoxingtan22
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目的对载有肿瘤转移抑制基因nm23H1的重组腺相关病毒(AAV)载体进行构建及鉴定.方法用基因重组的方法构建含全长nm23H1的重组腺相关病毒骨架质粒,利用磷酸钙沉淀法将腺相关病毒载体系统共转染入病毒包装细胞293细胞中,分别合成AAV-nm23H1和AAV-Laz,经PCR,DNA测序,酶切鉴定,用斑点杂交法测定重组病毒的滴度.并用重组病毒感染卵巢癌细胞测定其转染效率.结果成功构建并鉴定nm23H1,梯度均为1010病毒分子/ml,转染效率为70%.结论构建AAV-nm23H1为临床治疗肿瘤转移提供了新
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