【摘 要】
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目的观察瞬时感受器电位香草酸受体3离子通道蛋白(TRPV3)表达对体外膀胱癌细胞株SW780的增殖凋亡和生物学功能的影响。方法应用基因转染方法观察TRPV3基因表达对体外膀胱癌细胞SW780的抗增殖作用和生物学功能的影响；通过免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测TRPV3 mRNA在SW780细胞中的表达水平，Real-time PCR测定转染后SW780细胞
【机 构】
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274000 山东省菏泽市立医院泌尿外科,274000 山东省菏泽市立医院 妇产科
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目的观察瞬时感受器电位香草酸受体3离子通道蛋白(TRPV3)表达对体外膀胱癌细胞株SW780的增殖凋亡和生物学功能的影响。
方法应用基因转染方法观察TRPV3基因表达对体外膀胱癌细胞SW780的抗增殖作用和生物学功能的影响；通过免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测TRPV3 mRNA在SW780细胞中的表达水平，Real-time PCR测定转染后SW780细胞中Ras、Raf、蛋白激酶B(Akt)和细胞外信号调节激酶(ERK)mRNA水平表达变化，并通过噻唑蓝(MTT)法、划痕实验、苏木素-伊红(HE)染色、显微镜等观察比较转染TRPV3基因的SW780细胞的迁移能力、增殖凋亡和形态学改变。
结果Real-time PCR和免疫组织化学结果证实转染后SW780细胞中有TRPV3稳定表达；Real-time PCR结果显示：A组Ras、Raf和Akt mRNA吸光度值分别为0.87±0.17、0.46±0.11和0.92±0.25，B组分别为1.71±0.32、1.63±0.29和1.95±0.38，C组分别为1.59±0.30、1.51±0.25和1.80±0.31。转染后SW780细胞中Ras、Raf和Akt mRNA水平显著降低(P<0.01)。MTT法结果显示，SW780细胞A组(10∶1)24 h和48 h的抑制率分别为(19.58±2.83)%和(46.23±3.99)%，A组(20∶1)分别为(44.64±5.27)%和(68.73±7.51)%，A组(40∶1)分别为(59.63±6.85)%和(79.52±7.93)%。B、C组SW780细胞在24 h和48 h时无明显凋亡。表明随着TRPV3与SW780细胞效靶比增加及作用时间延长，抑制率明显增强(P<0.01)。划痕实验结果显示：TRPV3转染的SW780细胞迁移能力低于正常SW780细胞。TRPV3作用于膀胱癌细胞24 h后，形态学观察膀胱癌细胞发生凋亡或坏死。
结论TRPV3基因转染对体外膀胱癌细胞SW780细胞具有抑制增殖和促进凋亡作用。
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