研究微小核糖核酸(miRNA)-203在寻常性银屑病患者皮损中的表达,并探讨对角质形成细胞株(HaCaT细胞)增殖的影响。
方法取2014—2016年23例寻常性银屑病患者的皮损组织和相邻非皮损组织。荧光定量PCR法检测组织中miRNA-203的表达水平,并以5′端、3′端地高辛标记的探针对皮肤组织切片中目的miRNA进行原位杂交,观察miRNA-203在皮肤组织中的定位情况。将miRNA-203模拟物(miRNA-203模拟物组)和miRNA-203模拟物阴性对照(阴性对照组)分别转染HaCaT细胞,正常细胞培养组作为空白对照组,采用噻唑蓝(MTT)法、流式细胞仪和Western印迹法分别对HaCaT细胞的增殖、细胞周期及相关周期蛋白(Cyclin D1、Cyclin B1)的变化进行检测。
结果miRNA-203特异性地表达在表皮的角质形成细胞中,除细胞核外,细胞质亦有表达,且寻常性银屑病患者皮损组织中miRNA-203表达水平(1.35 ± 0.28)显著高于非皮损组织(0.52 ± 0.09),差异有统计学意义(t= 6.76,P= 0.012)。转染miRNA-203模拟物能抑制HaCaT细胞增殖(F= 9.36,P= 0.007),且空白对照组、阴性对照组和miRNA-203模拟物组HaCaT细胞增殖率均随时间的延长逐渐增加(F= 18.68,P < 0.001)。与阴性对照组和空白对照组相比,miRNA-203模拟物组HaCaT细胞被阻滞在G2/M期(G2/M期细胞比例:31.33% ± 4.56%比17.02% ± 3.53%、16.67% ± 3.32%,均P < 0.05),HaCaT细胞周期蛋白周期蛋白D1表达水平较高(1.15 ± 0.13比0.52 ± 0.05、0.56 ± 0.07,均P < 0.05),而周期蛋白B1水平较低(0.43 ± 0.08比0.93 ± 0.16、0.91 ± 0.0.15,均P < 0.05)。
结论miRNA-203可能参与了寻常性银屑病的发生发展过程。