流感病毒RNA聚合酶PB1-1亚基片段的克隆及表达

来源 :哈尔滨医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jhyh001
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目的将流感病毒RNA聚合酶合酶PB1-1亚基进行亚克隆、表达,获得重组的亚克隆多肽,为进一步研究PB1亚基功能奠定基础.方法以PB1亚基cDNA为模板,用PCR方法扩增出PB1-1片段,应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pQE30重组,阳性克隆重组质粒经酶切及测序鉴定,IPTG诱导各亚克隆系高效表达;优化表达条件.结果 PCR法扩增出487bp的片段,酶切及测序鉴定获得正确的重组质粒,在E.coli M15中表达得到相对分子量约为20KD的重组蛋白,获得重组多肽.结论成功地亚克隆及表达了流感病毒R
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