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以甘肃省天祝县牦牛牧区采集的土壤样品中分离得到的产凝乳酶细菌为研究对象,对产酶菌株进行筛选,将产凝乳酶活力高、蛋白水解活力低的菌株C5作为发酵菌株,并对发酵过程中发酵培养基、发酵时间、诱导物添加量、Ca2＋含量等因素进行了分析.通过正交试验得到影响菌株C5产凝乳酶活力最显著的因素为培养基浓度,其次是Ca2＋浓度,最后是酪蛋白添加量;通过试验优化,凝乳酶活力最高可达169.27SU/mL.