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目的：利用RNA干扰技术，筛选出可以高效、特异性抑制肿瘤坏死因子-α（TNF—α）表达的小发夹状RNA（shRNA）片段，设计并构建质粒重组体，进行序列分析，为探索TNF—α相关疾病的基因治疗提供新途径。方法：原代培养小鼠腹腔巨噬细胞，15％DMEM培养液调细胞浓度为2×10^7cells／L接种于6孔板，3mL／well；细胞用脂多糖（LPS）激活，ELISA法测不同时间培养上清中TNF—α的浓度；将针对TNF—d基因的5段shRNA干扰片段的表达框经PCB扩增、纯化后，与转染试剂混合转染入巨