【摘 要】
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为实现T-2毒素的可视化毒性筛查,利用T-2毒素毒性通路中AP-1的关键靶点应答元件TRE与红色荧光蛋白(mCherry)的启动子构建pcDNA3.1-TRE-mChenry荧光质粒,建立荧光HEK293细胞传感筛查模型;同时,为验证该细胞传感模型的适用性,对实际样品中残留的T-2毒素和T-2毒素的主要代谢产物HT-2毒素进行了毒性监测.结果 表明,T-2毒素刺激模式细胞8h时,细胞内的红色荧光强度达到最高值并趋于稳定.当T-2毒素质量浓度在1～25 ng/mL时,其与荧光强度呈线性相关,线性方程为y=1
【机 构】
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江南大学食品学院,江苏无锡214122
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为实现T-2毒素的可视化毒性筛查,利用T-2毒素毒性通路中AP-1的关键靶点应答元件TRE与红色荧光蛋白(mCherry)的启动子构建pcDNA3.1-TRE-mChenry荧光质粒,建立荧光HEK293细胞传感筛查模型;同时,为验证该细胞传感模型的适用性,对实际样品中残留的T-2毒素和T-2毒素的主要代谢产物HT-2毒素进行了毒性监测.结果 表明,T-2毒素刺激模式细胞8h时,细胞内的红色荧光强度达到最高值并趋于稳定.当T-2毒素质量浓度在1～25 ng/mL时,其与荧光强度呈线性相关,线性方程为y=1.14938x+64.72,R2=0.969.根据剂量曲线得出T-2毒素的EC50为16.27 ng/mL,检测限为0.691 ng/mL.该细胞传感模型用于样品加标实验,平均加标回收率为86.13％～126.20％,对HT-2毒素进行毒性筛查得到EC50为27.65 ng/mL.
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