【摘 要】
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通过3＇端2次高效热不对称交互PCR（hiTAIL-PCR）和5＇端4次hiTAIL-PCR及1次长链PCR获得了转基因抗虫棉材料06N-119的外源DNA插入片段的全序列。外源DNA插入片段全长11578bp,由NptⅡ
【机 构】
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中国农业科学院烟草研究所,中国农业科学院生物技术研究所
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通过3＇端2次高效热不对称交互PCR（hiTAIL-PCR）和5＇端4次hiTAIL-PCR及1次长链PCR获得了转基因抗虫棉材料06N-119的外源DNA插入片段的全序列。外源DNA插入片段全长11578bp,由NptⅡ基因和Bt基因两个表达盒串联构成。插入位点处缺失75个碱基,未发生基因重组现象。根据3＇端旁侧序列设计引物,特异性和灵敏度检测结果表明,建立的3＇端定性PCR检测方法特异性强,灵敏度高,最低检测限为每100ng模板量的0.05%,相当于11个靶标序列拷贝。本研究结果对转基因抗虫棉外源基因
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