【摘 要】
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本文用ＳＬＥ病人外周血淋巴细胞抽提ＲＮＡ，采用ＲＴＰＣＲ反应以人的特异性ＨｕＶＨＢＡＣＫ、ＨｕＪＨＦＯＲ和ＨｕＶＬＢＡＣＫ、ＨｕＶＬＦＯＲ引物扩增人抗体的ＶＨ和ＶＬ基因片段，并将其与ｌｉｎｋｅｒ拼接成ＳｃＦｖ片段克隆于大肠杆菌，使其与噬菌体基因Ⅲ的产物以融合蛋白的形式在噬菌
【机 构】
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上海第二医科大学附属仁济医院风湿病科,上海免疫研究所临床免疫研究室
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本文用ＳＬＥ病人外周血淋巴细胞抽提ＲＮＡ，采用ＲＴＰＣＲ反应以人的特异性ＨｕＶＨＢＡＣＫ、ＨｕＪＨＦＯＲ和ＨｕＶＬＢＡＣＫ、ＨｕＶＬＦＯＲ引物扩增人抗体的ＶＨ和ＶＬ基因片段，并将其与ｌｉｎｋｅｒ拼接成ＳｃＦｖ片段克隆于大肠杆菌，使其与噬菌体基因Ⅲ的产物以融合蛋白的形式在噬菌体表面表达，从而构建了ＳＬＥ病人的单链噬菌体抗体库，ＥＬＩＳＡ检测证明ＳｃＦｖ基因产物具有抗体活性。ＳＬＥ噬菌体抗体库的构建为ＳＬＥ发病机理、诊断和治疗研究打下了良好的基础。
In this paper, SLE patients with peripheral blood lymphocytes RNA extraction, RT-PCR reaction with human-specific HuVHBACK, HuJHFOR and HuVLBOR, HuVLFOR primers amplified human antibody VH and VL gene fragment, and its splicing with the linker into ScFv fragment Was cloned in Escherichia coli so that the product of phage gene Ⅲ was expressed on the surface of the phage as a fusion protein to construct a single-stranded phage antibody library of SLE patients. ELISA test showed that the ScFv gene product had the activity of antibody. SLE phage antibody library construction for the pathogenesis of SLE, diagnosis and treatment of research laid a good foundation.
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