原核表达系统pET28a(+)中抗CD20微抗体的构建和表达

来源 :南京师大学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:mengfengye
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目的:改造Rituximab,构建包含VL、VH和CH3的抗CD20微抗体minibody,并探索诱导其可溶性表达的最佳方法.方法:首先通过overlapPCR将Rituximab的VL和VH通过Linker连接在一起,成为单链抗体ScFv,再将ScFv和人源IgG1 CH3通过人源IgGl铰链区连成minibody的cDNA.将其克隆至表达载体pET28a(+)中,并在大肠杆菌中用IPTG诱导表达.结果:SDS.PAGE和Western blot结果表明,抗CD20的微抗体基因表达产物分子量约41.88
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