【摘 要】
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目的 基于Notch信号通路,探讨β-榄香烯逆转肺腺癌耐药的机制.方法 选择对A549/DDP细胞无细胞毒性的β-榄香烯浓度处理A549/DDP细胞,设β-榄香烯组与对照组,两组细胞均给予不同浓度的DDP(0.25、0.5、1、2、4、8、16、32 μg·mL-1)处理24 h,MTT法检测细胞活力并计算IC50,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blotting检测凋亡相关蛋白(cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9)、耐药相关蛋白(P-gp、survivin、p
【机 构】
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海安市中医院肿瘤科,江苏南通,226600;南通市中医院,江苏南通,226001;南京中医药大学,江苏南京,210023
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目的 基于Notch信号通路,探讨β-榄香烯逆转肺腺癌耐药的机制.方法 选择对A549/DDP细胞无细胞毒性的β-榄香烯浓度处理A549/DDP细胞,设β-榄香烯组与对照组,两组细胞均给予不同浓度的DDP(0.25、0.5、1、2、4、8、16、32 μg·mL-1)处理24 h,MTT法检测细胞活力并计算IC50,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blotting检测凋亡相关蛋白(cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9)、耐药相关蛋白(P-gp、survivin、p21)及Notch信号通路蛋白(Notch1、Hes1、Hey2)的表达.A549/DDP细胞在β-榄香烯处理的基础上,联合1μg· mL-1 Notch信号通路激活剂rhNF-κB处理,比较两组的IC50,Western blotting检测P-gp以及Notch1、Hes1、Hey2的表达.结果 当β-榄香烯浓度低于20 μg·mL-1时,其对A549/DDP细胞的抑制率小于10％,无细胞毒性.β-榄香烯组DDP的IC50显著低于对照组(t=14.712,P＜0.05),逆转倍数为4.452倍.β-榄香烯组细胞凋亡率以及凋亡相关蛋白cleaved-caspase 3和cleaved-caspase 9的表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).β-榄香烯组P-gp、survivin蛋白相对表达量低于对照组,而p21蛋白相对表达量高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).3-榄香烯组Notch1、Hes1、Hey2蛋白相对表达量均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).β-榄香烯+rhNF-κB组DDP的IC50以及P-gp、Notch1、Hes1、Hey2蛋白表达水平均高于β-榄香烯组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 β-榄香烯可通过抑制Notch信号通路促进A549/DDP细胞凋亡,并逆转肺腺癌耐药.
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