【摘 要】
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目的 建立抗BP180NC16A IgG亚型的检测方法,并探讨其在大疱性类天疱疮(BP)中的意义.方法 原核表达GST-NC16A融合蛋白,并采用亲和层析法纯化.优化ELISA关键环节,建立抗BP180NC
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院皮肤科,美国北卡罗来纳大学教堂山分校皮肤科
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目的 建立抗BP180NC16A IgG亚型的检测方法,并探讨其在大疱性类天疱疮(BP)中的意义.方法 原核表达GST-NC16A融合蛋白,并采用亲和层析法纯化.优化ELISA关键环节,建立抗BP180NC16A IgG各亚型的ELISA检测方法,并对10例未经治疗的BP、5例妊娠疱疹、1例成人线状IgA大疱性皮病、2例天疱疮患者血清分别进行检测.结果 通过方阵测定法确定GST-NC16A融合蛋白的包被浓度为500 μg/L,包被条件为4℃12h,血清稀释倍数为1∶100,酶标二抗为1∶2000,孵育条件为37℃1h,底物反应条件37℃20 min.10例大疱性类天疱疮患者10例IgG1阳性,9例IgG2阳性,5例IgG3阳性,9例IgG4阳性.2例寻常型天疱疮、1例成人线状IgA大疱性皮病均阴性.5例妊娠疱疹所有亚型均阳性,以IgG1和IgG3亚型为主.结论 抗BPI80NCI6A ELISA检测法特异性强、重复性好,是检测BP和妊娠疱疹患者抗BP180NC 16A抗体亚型的半定量方法.
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