N-糖酰胺酶F在大肠杆菌中的高效表达及其脱糖基化作用研究

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：herangxu

【摘要】

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从脑膜炎脓杆菌(Flavobacterium meningosepticum)基因组中通过PCR扩增了N-糖酰胺酶F(PNGase F)基因,经酶切后与表达载体pET28a连接,获得的重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3).重

【作者】

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苏移山王圣钧王鹏祁庆生

【机构】

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山东大学微生物技术国家重点实验室

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

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2005年6期

【关键词】

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N-糖酰胺酶F PET28a RNASE B 脱糖基化 PNGase F pET28a RNase B deglycosylation

【基金项目】

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中国科学院资助项目

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从脑膜炎脓杆菌(Flavobacterium meningosepticum)基因组中通过PCR扩增了N-糖酰胺酶F(PNGase F)基因,经酶切后与表达载体pET28a连接,获得的重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3).重组大肠杆菌经诱导表达和纯化提取后,获取大量高纯度N-糖酰胺酶F,其纯度达90%以上.试验证明,经纯化的重组N-糖酰胺酶F可以切除核糖核酸酶B、转铁蛋白和人IgG等糖蛋白上的N-糖链,具有脱糖基化作用.

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