【摘 要】
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建立实时荧光PCR快速鉴定伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhi)的方法。根据GenBank公布的伤寒沙门氏菌基因序列,设计引物和Taqman探针,采用实时荧光PCR进行特异性、灵敏性及模拟
【机 构】
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辽宁出入境检验检疫局,广东出入境检验检疫局
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建立实时荧光PCR快速鉴定伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhi)的方法。根据GenBank公布的伤寒沙门氏菌基因序列,设计引物和Taqman探针,采用实时荧光PCR进行特异性、灵敏性及模拟样品的检测实验。结果表明,特异性引物和探针可从31株伤寒沙门氏菌菌株、27株其他血清型沙门氏菌和7株非沙门氏菌菌株中鉴定出全部的31株伤寒沙门氏菌。以伤寒沙门氏菌梯度稀释菌液DNA为模板进行实时荧光PCR扩增,菌株模板浓度与Ct值呈良好线性关系,线性系数为0.994,扩增效率为94.5%,最低检测浓度为4cfu/mL的添加浓度。实时荧光PCR检测与传统方法相比较,两者结果一致。该方法特异性好、灵敏度高,可以快速鉴定伤寒沙门氏菌。
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