【摘 要】
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目的：探讨丝胶对高糖所致足细胞损伤时c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路相关蛋白的表达及足细胞凋亡的影响，阐明丝胶的保护作用及其可能机制。方法：分化成熟的条件永生化小鼠足细胞随机分为正常对照组(含5.5 mmol·L-1葡萄糖的培养基)、高渗对照组(含5.5 mmol·L-1葡萄糖+24.5 mmol·L-1甘露醇的培养基)、高糖组(含30.0 mmol·L-1葡萄糖的培养基)、低浓度丝胶组(
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81441133）； 河北省科技厅自然科学基金项目（H2013406096）； 河北省卫健委医学科学研究项目（20210468）；
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目的：探讨丝胶对高糖所致足细胞损伤时c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路相关蛋白的表达及足细胞凋亡的影响，阐明丝胶的保护作用及其可能机制。方法：分化成熟的条件永生化小鼠足细胞随机分为正常对照组(含5.5 mmol·L-1葡萄糖的培养基)、高渗对照组(含5.5 mmol·L-1葡萄糖+24.5 mmol·L-1甘露醇的培养基)、高糖组(含30.0 mmol·L-1葡萄糖的培养基)、低浓度丝胶组(含30.0 mmol·L-1葡萄糖+150.0 mg·L-1丝胶的培养基)、中浓度丝胶组(含30.0 mmol·L-1葡萄糖+300.0 mg·L-1丝胶的培养基)和高浓度丝胶组(含30.0 mmol·L-1葡萄糖+600.0 mg·L-1丝胶的培养基)。采用光学倒置显微镜观察各组足细胞形态表现，实时荧光定量PCR （RT-q PCR）法检测各组足细胞中裂孔膜蛋白（Nephrin）、丝裂原活化蛋白激酶激酶1 （MEKK1）、丝裂原活化蛋白激酶激酶4 （MKK4）、c-Jun氨基末端激酶1 （JNK1）和c-Jun m RNA表达水平，Western blotting法检测各组足细胞中Nephrin、MEKK1、MKK4、JNK1和c-Jun蛋白表达水平，AnnexinⅤ/PI双染法检测各组足细胞凋亡率。结果：正常对照组足细胞胞体较大，并延伸生出树枝状突起；与正常对照组比较，高糖组足细胞胞体回缩变小，细胞间隔增大，脱落和悬浮的足细胞数目增多；与高糖组比较，不同浓度丝胶组足细胞形态逐渐趋于正常。高糖组足细胞中Nephrin m RNA和蛋白表达水平较正常对照组均明显降低（P＜0.05），表明高糖致足细胞损伤模型建立成功。高糖组足细胞中MEKK1、MKK4、JNK1、c-Jun m RNA和蛋白表达水平较正常对照组明显升高（P＜0.05）；不同浓度丝胶组足细胞中MEKK1、MKK4、JNK1和c-Jun m RNA及蛋白表达水平较高糖组明显降低（P＜0.05），且高浓度丝胶组足细胞中MEKK1、MKK4、JNK1和c-Jun m RNA及蛋白表达水平较中浓度丝胶组明显降低（P＜0.05），中浓度丝胶组足细胞中MEKK1、MKK4、JNK1和c-Jun m RNA及蛋白表达水平较低浓度丝胶组明显降低（P＜0.05）。高糖组和高渗对照组足细胞凋亡率较正常对照组明显升高（P＜0.05）；不同浓度丝胶组足细胞凋亡率较高糖组明显降低（P＜0.05），且高浓度丝胶组足细胞凋亡率较中浓度丝胶组明显降低（P＜0.05），中浓度丝胶组足细胞凋亡率较低浓度丝胶组明显降低（P＜0.05）。结论：丝胶对高糖所致足细胞损伤发挥保护作用，其机制可能与抑制JNK信号通路中MEKK1、MKK4、JNK1和c-Jun的表达及抑制足细胞凋亡有关联。
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