淋巴途径在烫伤大鼠肠道细菌移位中的作用

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目的了解淋巴途径在烫伤大鼠肠道细菌移位中的作用。方法制备羰花青荧光染料CM—DIL标记的大肠埃希菌菌液(数量级10 9CFU/L)。将60只成年雄性Wistar大鼠按照信封法随机分为烫伤组、假伤组,每组30只。2组大鼠经胃灌注已制备的标记菌液0.5mL后,烫伤组致30%TBSA深Ⅱ度烫伤,伤后立即行液体复苏;假伤组大鼠皮肤经25℃水浴10s模拟烫伤并同法复苏。采集2组大鼠伤后2、24、72h(每时相点10只)的肠系膜淋巴结(MLN)、肝脏、肠系膜淋巴液(MLF)、肝静脉血标本。分别采用荧光示踪法和细菌培养法检测细菌移位情况;用鲎试剂显色基质法定量测定上述4种标本中内毒素含量,并计算MLF和肝静脉血的内毒素携带量。对实验数据行t检验或单因素方差分析。结果(1)荧光示踪法检测显示活菌呈短棒状,液体标本中可见单体或两三个联体的可移动活菌;死菌呈不规则碎片状。假伤组伤后2h有少量标记菌,24h数量达高峰;烫伤组伤后2h标记菌较多,24、72h仍处于较高水平。烫伤组各种标本比较,MLN内标记菌最多,伤后24h达高峰[(5872±1976)×10 3CFU/g],明显多于假伤组[(216+-110)×10 3CFU/g,t=30.129,P=0.000],72h有所减少但仍多于假伤组(t=4.323,P=0.000);血液内标记菌最少。(2)细菌培养法检测:假伤组120份标本中,29份细菌培养呈阳性占24.2%;烫伤组120份标本中,72份培养阳性占60.0%。2组大鼠除血液标本在各时相点均未检出活菌外,其余3种标本伤后2h或24h可培养出活菌。烫伤组MLN和肝脏较其余2种组织检出更多活菌;伤后24h,该组MLN、肝脏以及MLF标本中细菌数量均明显多于假伤组(t值分别为4.353、4.354、4.965,P值均等于0.000)。(3)内毒素含量:烫伤组大鼠伤后各时相点4种标本的内毒素含量均高于假伤组,其中肝脏、MLF内毒素含量伤后2h即达高峰。此时相点烫伤组4种组织间内毒素含量比较,差异有统计学意义(F=258.47,P=0.000),其中肝脏、MLN、MLF内毒素含量较高,且明显高于假伤组(t值分别为43.378、43.123、22.423,P值均等于0,000);MLF内毒素含量约为血液中含量的9倍。(4)烫伤组伤后各时相点MLF、血液内毒素携带量均高于假伤组。结论用CM—DIL标记细菌能够较全面反映细菌移位情况,淋巴途径在细菌移位中发挥重要作用。

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