【摘 要】
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目的 通过体外培养大鼠系膜细胞(MC),观察尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)对高糖环境下MC增殖及表型转化的影响及其可能的信号转导机制.方法 体外培养大鼠MC,分为4组:对照组、高
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目的 通过体外培养大鼠系膜细胞(MC),观察尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)对高糖环境下MC增殖及表型转化的影响及其可能的信号转导机制.方法 体外培养大鼠MC,分为4组:对照组、高糖组、高糖+渥曼青霉素组、高糖+uPA组.MTT法检测各组MC增殖情况.流式细胞仪分析各组MC细胞周期改变.Western印迹法检测各组MC表达CDK2与p27kip1变化,并测定MC中信号蛋白Akt的活性.激光共聚焦显微镜检测各组MC中α-SMA表达方式及表达量变化.结果 培养24 h后高糖组MC增殖程度较对照组显著增加(P＜0.01),渥曼青霉素与uPA组可明显抑制细胞增殖(P＜0.01).高糖刺激Akt活性,渥曼青霉素与uPA组Akt活性均较高糖组显著降低(均P＜0.01).高糖组MC培养24 h后,p27kip1蛋白表达较对照组显著减少(P＜0.01);高糖+渥曼青霉素组、高糖+uPA组p27kip1蛋白表达均较高糖组显著增加(均P＜0.01);各组CDK2蛋白表达无明显变化.高糖组MC培养24 h后,胞质中α-SMA表达较对照组显著增加(P＜0.01),并在核周出现聚集;高糖+渥曼青霉素组、高糖+uPA组α-SMA表达量均较高糖组显著减少(均P＜0.01),其分布与对照组无显著差异.结论 uPA可能通过抑制Akt信号分子活性,上调p27kip1表达,拮抗高糖所致MC增殖与表型转化.
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