【摘 要】
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目的:建立SYBR Green I实时荧光PCR定量检测人POT1基因的方法.方法:依据人POT1基因及参照基因TBP基因序列设计引物,以人类乳腺癌细胞系MCF-7总RNA逆转录合成的cDNA为模版,以T
【机 构】
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华中科技大学附属协和医院检验科,武汉,430022;福建省立医院检验科
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目的:建立SYBR Green I实时荧光PCR定量检测人POT1基因的方法.方法:依据人POT1基因及参照基因TBP基因序列设计引物,以人类乳腺癌细胞系MCF-7总RNA逆转录合成的cDNA为模版,以TBP基因为参照基因,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测POT1基因的表达.结果:POT1和TBP基因熔解曲线为单峰,无杂峰及二聚体.POT1基因及参照基因TBP基因扩增效率相同(直线斜率0.0171＜0.1).POT1基因批内变异与批间变异分别为1.3%和2.1%;TBP基因批内变异与批问变异分别为1.2%和2.6%.结论:建立了SYBR Green Ⅰ实时定量检测人类POT1基因的方法,该方法简单快速,经济,灵敏度高,特异性和重复性好,可用于人类POT1基因的定量分析.
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