【摘 要】
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目的:应用同一种商品化EB病毒核酸定量检测试剂盒在2款实时荧光定量PCR仪同时检测外周血标本中EB病毒载量,探讨不同类型的实时荧光PCR仪对EBV DNA定性和定量检测结果的影响.方法:提取179例外周血标本(包括102例全血和77例血浆)的DNA后,应用EB病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)分别在2款实时荧光PCR仪Cobas z480和LightCycler 480 Ⅱ上同时检测EBV DNA,定性结果采用配对x2检验和Kappa一致性检验,定量结果采用配对t检验、Spearman相关分析和
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科,武汉,430022
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目的:应用同一种商品化EB病毒核酸定量检测试剂盒在2款实时荧光定量PCR仪同时检测外周血标本中EB病毒载量,探讨不同类型的实时荧光PCR仪对EBV DNA定性和定量检测结果的影响.方法:提取179例外周血标本(包括102例全血和77例血浆)的DNA后,应用EB病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)分别在2款实时荧光PCR仪Cobas z480和LightCycler 480 Ⅱ上同时检测EBV DNA,定性结果采用配对x2检验和Kappa一致性检验,定量结果采用配对t检验、Spearman相关分析和线性回归分析以及Bland-Altman图分析.结果:①应用Cobas z480和LightCycler 480 Ⅱ检测179例血标本中EBV DNA的阳性检出率分别为49.72％(89/179)、48.60％(87/179),Kappa值为0.9553,一致性较好;两者的阳性符合率为98.85％、阴性符合率为96.74％,总符合率为97.77％.②在定量范围内的56例EBV阳性血样本,Cobas z480和LightCycler 480Ⅱ的检测值分别为3.943±0.913、3.726±0.980 log10copies/mL,差异有统计学意义(P＜0.05);进一步进行Spearman相关性以及线性回归分析,相关系数r=0.9626,回归方程为Y=1.0656X-0.4754(r2=0.9853);2款实时荧光PCR仪检测的差值平均值为0.216 log10copies/mL,差值标准差为0.133 log10 copies/mL,95％一致性界限为(-0.045,0.478)log10 copies/mL,96.43％ (54/56)的点在95％一致性界限以内,界外点数为2(3.57％).结论:2款实时荧光定量PCR仪Cobas z480和LightCycler 480 Ⅱ检测外周血样本中EBV DNA,结果具有可比性,但Cobas z480上的检测结果平均比LightCycler 480 Ⅱ上的高,可能是由于2款PCR仪所使用的光源和滤光片组合不同所致.
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