【摘 要】
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目的：构建针对葡萄糖神经酰胺合成酶（GCS）mRNA的siRNA表达载体,并观察其对转染细胞中GCS表达的影响。方法：根据人GCSmRNA编码序列,设计并合成3对针对GCS的发卡状RNA的寡核苷酸,各
【机 构】
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郑州大学基础医学院药理学教研室,郑州大学基础医学院组织学与胚胎学教研室,郑州大学第一附属医院消化内科,郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室
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目的：构建针对葡萄糖神经酰胺合成酶（GCS）mRNA的siRNA表达载体,并观察其对转染细胞中GCS表达的影响。方法：根据人GCSmRNA编码序列,设计并合成3对针对GCS的发卡状RNA的寡核苷酸,各64个碱基,退火后插入pSUPEREGFP载体重组构建RNAi质粒,进行双酶切及测序鉴定。重组质粒用脂质体包裹转染入SGC7901/VCR细胞,采用RT-PCR检测GCSmRNA表达水平的变化。结果：重组构建的载体经酶切鉴定与测序分析,显示特定位点靶序列与设计序列完全一致。转染SGC7901/VCR细胞后,G
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