丹皮酚联合5-FU对食管癌EC9706细胞增殖及凋亡的影响

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目的:探讨丹皮酚(paeonol,Pae)单独及联合5-FU对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用.方法:采用6种浓度的Pae(7.81、15.63、31.25、62.50、125.00、250.00mg/L)、3种浓度的5-FU(12.50、25.00、50.00mg/L)及Pae(31.25mg/L)和5-FU(12.50mg/L)联合分别处理EC9706细胞24、48、72h,同时设对照组(细胞不做处理),采用MTT法检测各个时间段细胞的增殖情况;采用流式细胞术检测4种浓度的Pae(31.25、62.50、125.00、250.00mg/L)处理EC9706细胞72h后细胞周期的变化;倒置显微镜下观察各Pae组细胞各时间段形态学变化,HE染色光镜下观察凋亡细胞;采用免疫细胞化学法检测经Pae(31.25mg/L)、5-FU(12.50mg/L)单独和联合作用48h后细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达.结果:Pae、5-FU可明显抑制EC9706细胞增殖,并随着浓度的增加和作用时间的延长而增强(P<0.05),Pae与5-FU联合用药比单用Pae或5-FU抑制效果更明显(P<0.05);Pae作用后EC9706细胞中G0/G1期和G2/M期细胞比例下降,S期细胞比例上升(Pae125.00mg/L组:G0/G1期21.18%±2.28%vs62.17%±5.23%、G2/M期0.76%±0.54%vs9.92%±3.10%、S期78.06%±2.82%vs27.91%±2.13%,均P<0.05);HE染色光镜下可见典型的肿瘤细胞凋亡改变;Pae、5-FU可下调EC9706细胞中Bcl-2蛋白表达,同时增强EC9706细胞中Bax蛋白的表达,联合用药组较单药组作用更为明显(2.21±0.14vs5.67±0.30,4.22±0.34;8.55±0.33vs3.90±0.27,6.28±0.26,均P<0.05).结论:Pae可明显抑制人食管癌EC9706细胞的增殖,促进其凋亡,Pae联合5-FU作用更为明显.
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