论文部分内容阅读
唐菖蒲(Gladiolus hybridus)在生长过程中,易受不良环境的影响及真菌感染产生多种病害,如叶片锈病、根腐、球茎腐烂病等真菌性病害及病毒病害,这些真菌性病害和病毒病害都严重影响唐菖蒲植株的生长势及鲜切花的观赏价值。本研究于2013-2014年对青海省唐菖蒲主产区田间及球茎贮藏期间的病害发生进行了调查,以确定发病种类、危害程度,并进行田间取样,在室内分离培养,通过显微镜观察鉴定和回接实验,研究病原菌种类及致病性。研究结果发现:唐菖蒲生长期间有3种真菌性病害(球茎腐烂病、根腐病和锈病)和1种病毒病(烟草花叶病),而贮藏期间球茎发生球茎腐烂症状。田间发病最严重的是真菌性病害,发病率为7.8%~66.7%(重茬地块发病率最高)。真菌性病害中尤其是球茎腐烂病和根腐病受地区气候影响最大,夏季高温和平均温度较高的地区发病率越重,因此,作为种球繁殖基地,夏季气候冷凉是减轻发病率的关键。田间病原菌分离后经荧光显微鉴定证实尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)是唐菖蒲根腐病的致病病原;青霉菌(Peniaillum sp.)为青霉属真菌,但回接后无致病性;单胞锈菌(Uromyces sp.)为唐菖蒲叶片锈病的致病病原。不同贮藏方式及贮藏温度下的发病种类和发病率存在较大差异,从贮藏期间腐烂的球茎上我们分离到3种病原真菌,经显微鉴定和回接实验证实为无致病性的次生真菌和球茎腐烂病致病病原。采用r DNA-ITS分子标记对贮藏期间病原菌8个样进行鉴定,通过DNA提取、通用引物扩增r DNA基因族ITS全序列、PCR产物的回收纯化及序列分析,对测定序列blast比对表明:Gp6的r DNA-ITS序列与Talaromyces funiculosus菌株的ITS序列同源性高达99.75%,确定为青霉属、篮状菌亚属中的Talaromyces funiculosus。2013、2014年通过生长期间叶片、花瓣的表现特征,对田间疑似携带病毒的植株,分别选用黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)和烟草环斑病毒(Tobacco ring spot virus,TRSV)三种病毒ELISA试剂盒进行双抗体夹心酶联免疫检测。对24组样品进行检测,空白对照及标样阴阳性检测证明试剂盒酶标板灵敏有效,其中,黄瓜花叶病毒、烟草环斑病毒的样品OD值均小于临界值(CUT OFF),判定为阴性,即样品中未检测到黄瓜花叶病毒、烟草环斑病毒。在烟草花叶病毒检测中,样品05、07的OD值大于临界值(CUT OFF),判定为阳性,即样品05、07中含有烟草花叶病毒。根据取样量和检测量比较,烟草花叶病毒的检出率达到8%左右。