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摘要 以海南本地油茶优良品种热研2号的嫩芽为外植体，开展了油茶组培体系建立的研究。结果表明，促进愈伤组织分化形成的最优条件是以WPM为基本培养基，其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L NAA 1.5 mg/L Silwet L-77 0.05%；促进发芽及生根的最优条件是以WPM为基本培养基，其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L NAA 0.8 mg/L 蔗糖3%。
关键词 油茶；组培体系；海南省
中图分类号 S794.4 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2018）12-0001-01
油茶是山茶属（Camellia）植物中种子含油率较高树种的统称，是我国特有的木本油料树种，油茶与油橄榄、油棕、椰子并称为世界四大木本油料作物[1-2]。海南将本地的油茶果称为“山柚”，其茶籽油称为“山柚油”，山柚油具有广泛的用途与神奇的功效，被海南人民视为珍品[3]。同时，油茶林是良好的生态林，油茶也是农林业产业结构调整、精准扶贫的重要经济作物，发展海南油茶产业具有很高的经济效益、社会效益和生态效益。大陆省份，油茶栽培最多的物种是普通油茶（Camellia oleifera Abel），海南种植的主要是越南油茶（Camellia vietnamensis T. C. Huang ex Hu）。越南油茶主要分布在海南省、广东南部以及越南、老挝等地，也称为陆川油茶，民间俗称高州油茶、大果油茶、白花油茶。
海南油茶虽然种植历史悠久，但在品种选育、良种繁育、丰产栽培和加工利用等方面的研究起步较晚，组织培养对油茶优良种质资源快速繁育和保存、生物技术育种等方面有着深远而重大的意义，对油茶产业的发展影响巨大。前人对普通油茶的组织培养进行了大量研究[4-5]，以生长在海南的越南油茶为研究材料的很少。本文以热研2号油茶优良无性系为材料，开展了越南油茶促愈伤组织分化和促进发芽生根组培体系的研究[6]，为海南本地油茶优良单株再生体系的建立奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验材料来自中国热带农业科学院油茶研究中心油茶种质资源圃（海南文昌），为油茶优良无性系热研2号（良种编号：琼R-SC-CO-005-2017）优树。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体处理。于2017年4月，采集长10～25 cm的油茶枝条带回实验室，取长1.0～2.0 cm的顶芽或腋芽，置于流水下冲洗1 h备用。
1.2.2 外植体接种。将冲洗后的外植体置于无菌超净台上，先用75%酒精快速灭菌10 s，然后用无菌水冲洗3次，接着用0.1% HgCl2消毒2 min，用无菌水冲洗3次，再用0.1% HgCl2消毒3 min，最后用无菌水冲洗5次后接种于愈伤诱导培养基上进行培养。诱导发芽发根时，在无菌条件下将诱导出的愈伤组织进行转接。
1.2.3 培养条件。培养基中琼脂为7 g/L。培养基用1 mol/L NaOH或HCl调节pH值为5.5～6.5，在恒温120 ℃和恒压1.1个大气压下消毒灭菌20 min。培养室温度（25±3）℃，光照时间12 h/d，光照强度2 000 lx。
2 结果与分析
2.1 不同培养基对油茶愈伤组织诱导成功率的影响
从表1可以看出，就不同基本培养基类型的诱导成功相比较，WPM基本培养基不同配方的愈伤诱导成功率平均值为96.74%，而MS基本培养基不同配方的愈伤诱导成功率平均值仅为77.11%；从诱导效果看，WPM基本培养基诱导的愈伤组织数量多，增殖系数大（图1a、b）。综合比较各配方因子的具体诱导效果，其最优的促进愈伤分化的培养基配方为以WPM为基本培养基，其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L NAA 1.5 mg/L Silwet L-77 0.05%。
2.2 不同培养基对油茶发芽生根诱导成功率的影响
从表2可以看出，就不同基本培养基类型的诱导成功相比较，WPM基本培养基不同配方的发芽生根诱导成功率平均值为90.05%，而MS基本培养基不同配方的发芽生根诱导成功率平均值仅为56.32%；从诱导效果看，WPM基本培养基诱导的无菌苗芽多，植株生长健壮（图1c、d）。综合比较各配方因子的具体诱导效果，其最优的促进发芽生根的培养基配方为以WPM为基本培养基，其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L NAA 0.8mg/L 蔗糖3%。
3 结论
试验结果表明，对于海南本地油茶优良品种热研2号而言，促进愈伤组织分化形成的最优条件是以WPM为基本培养基，其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L NAA 1.5 mg/L Silwet L-77 0.05%；促进其发芽及生根的最优条件是以WPM为基本培养基，其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L NAA 0.8 mg/L 蔗糖3%。
4 参考文献
[1] 李振纪.油茶[M].北京：中国林业出版社，1981.
[2] 莊瑞林.中国油茶[M].第2版.北京：中国林业出版社，2008.
[3] 陈良秋，杨伟波，李艳，等.海南岛油茶产业发展历程及展望[J].现代农业科技，2012（1）：374.
[4] 王瑞，陈永忠，王湘南，等.油茶组培苗高效增殖体系的建立[J].中南林业科技大学学报，2015，35（10）：40-43.
[5] 唐国涛，张汉永，黄锦荣，等.油茶组织培养繁殖技术初步研究[J].广东林业科技，2014，30（3）：25-29.
[6] 吴幼媚，王以红，蔡玲，等.油茶单芽组培生根研究[J].西部林业科学，2012，41（4）：25-28.
关键词 油茶；组培体系；海南省
中图分类号 S794.4 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2018）12-0001-01
油茶是山茶属（Camellia）植物中种子含油率较高树种的统称，是我国特有的木本油料树种，油茶与油橄榄、油棕、椰子并称为世界四大木本油料作物[1-2]。海南将本地的油茶果称为“山柚”，其茶籽油称为“山柚油”，山柚油具有广泛的用途与神奇的功效，被海南人民视为珍品[3]。同时，油茶林是良好的生态林，油茶也是农林业产业结构调整、精准扶贫的重要经济作物，发展海南油茶产业具有很高的经济效益、社会效益和生态效益。大陆省份，油茶栽培最多的物种是普通油茶（Camellia oleifera Abel），海南种植的主要是越南油茶（Camellia vietnamensis T. C. Huang ex Hu）。越南油茶主要分布在海南省、广东南部以及越南、老挝等地，也称为陆川油茶，民间俗称高州油茶、大果油茶、白花油茶。
海南油茶虽然种植历史悠久，但在品种选育、良种繁育、丰产栽培和加工利用等方面的研究起步较晚，组织培养对油茶优良种质资源快速繁育和保存、生物技术育种等方面有着深远而重大的意义，对油茶产业的发展影响巨大。前人对普通油茶的组织培养进行了大量研究[4-5]，以生长在海南的越南油茶为研究材料的很少。本文以热研2号油茶优良无性系为材料，开展了越南油茶促愈伤组织分化和促进发芽生根组培体系的研究[6]，为海南本地油茶优良单株再生体系的建立奠定基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
试验材料来自中国热带农业科学院油茶研究中心油茶种质资源圃（海南文昌），为油茶优良无性系热研2号（良种编号：琼R-SC-CO-005-2017）优树。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体处理。于2017年4月，采集长10～25 cm的油茶枝条带回实验室，取长1.0～2.0 cm的顶芽或腋芽，置于流水下冲洗1 h备用。
1.2.2 外植体接种。将冲洗后的外植体置于无菌超净台上，先用75%酒精快速灭菌10 s，然后用无菌水冲洗3次，接着用0.1% HgCl2消毒2 min，用无菌水冲洗3次，再用0.1% HgCl2消毒3 min，最后用无菌水冲洗5次后接种于愈伤诱导培养基上进行培养。诱导发芽发根时，在无菌条件下将诱导出的愈伤组织进行转接。
1.2.3 培养条件。培养基中琼脂为7 g/L。培养基用1 mol/L NaOH或HCl调节pH值为5.5～6.5，在恒温120 ℃和恒压1.1个大气压下消毒灭菌20 min。培养室温度（25±3）℃，光照时间12 h/d，光照强度2 000 lx。
2 结果与分析
2.1 不同培养基对油茶愈伤组织诱导成功率的影响
从表1可以看出，就不同基本培养基类型的诱导成功相比较，WPM基本培养基不同配方的愈伤诱导成功率平均值为96.74%，而MS基本培养基不同配方的愈伤诱导成功率平均值仅为77.11%；从诱导效果看，WPM基本培养基诱导的愈伤组织数量多，增殖系数大（图1a、b）。综合比较各配方因子的具体诱导效果，其最优的促进愈伤分化的培养基配方为以WPM为基本培养基，其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L NAA 1.5 mg/L Silwet L-77 0.05%。
2.2 不同培养基对油茶发芽生根诱导成功率的影响
从表2可以看出，就不同基本培养基类型的诱导成功相比较，WPM基本培养基不同配方的发芽生根诱导成功率平均值为90.05%，而MS基本培养基不同配方的发芽生根诱导成功率平均值仅为56.32%；从诱导效果看，WPM基本培养基诱导的无菌苗芽多，植株生长健壮（图1c、d）。综合比较各配方因子的具体诱导效果，其最优的促进发芽生根的培养基配方为以WPM为基本培养基，其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L NAA 0.8mg/L 蔗糖3%。
3 结论
试验结果表明，对于海南本地油茶优良品种热研2号而言，促进愈伤组织分化形成的最优条件是以WPM为基本培养基，其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L NAA 1.5 mg/L Silwet L-77 0.05%；促进其发芽及生根的最优条件是以WPM为基本培养基，其他因子组合为6-BA 2.0 mg/L NAA 0.8 mg/L 蔗糖3%。
4 参考文献
[1] 李振纪.油茶[M].北京：中国林业出版社，1981.
[2] 莊瑞林.中国油茶[M].第2版.北京：中国林业出版社，2008.
[3] 陈良秋，杨伟波，李艳，等.海南岛油茶产业发展历程及展望[J].现代农业科技，2012（1）：374.
[4] 王瑞，陈永忠，王湘南，等.油茶组培苗高效增殖体系的建立[J].中南林业科技大学学报，2015，35（10）：40-43.
[5] 唐国涛，张汉永，黄锦荣，等.油茶组织培养繁殖技术初步研究[J].广东林业科技，2014，30（3）：25-29.
[6] 吴幼媚，王以红，蔡玲，等.油茶单芽组培生根研究[J].西部林业科学，2012，41（4）：25-28.