【摘 要】
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目的探讨高盐饮食对小鼠肾髓质环氧化酶2(COX2)表达和尿钠排泄的影响及其相关机制。方法雄性C57BL/6j小鼠(n=30)被分为4组:(1)正常盐组(0.4%NaCl,n=5);(2)高盐组(8%NaCl,n=5);(3)硼替佐米+正常盐组(n=10);(4)硼替佐米+高盐组(n=10)。各组予生理盐水或硼替佐米预处理后,分别予正常盐或高盐饮食3 d,实验最后1 d于代谢笼中留取小鼠24 h尿液
【机 构】
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复旦大学附属华山医院肾脏科,上海 200040,复旦大学附属华山医院肾脏科,上海 200040,
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目的探讨高盐饮食对小鼠肾髓质环氧化酶2(COX2)表达和尿钠排泄的影响及其相关机制。
方法雄性C57BL/6j小鼠(n=30)被分为4组:(1)正常盐组(0.4%NaCl,n=5);(2)高盐组(8%NaCl,n=5);(3)硼替佐米+正常盐组(n=10);(4)硼替佐米+高盐组(n=10)。各组予生理盐水或硼替佐米预处理后,分别予正常盐或高盐饮食3 d,实验最后1 d于代谢笼中留取小鼠24 h尿液。麻醉处死小鼠,分别留取肾脏皮髓质,提取蛋白,部分组织固定。采用Western印迹法检测各组小鼠肾髓质COX2蛋白表达;用免疫组化法检测肾脏核转录因子κB(NF-κB)p65亚基及COX2表达;自动生化仪测定24 h尿钠排泄量。另将携带NF-κB启动子驱动的luciferase报告基因HLL转基因小鼠(HIV long-terminal-repeat,LTR)(n=8)分为两组:(1)正常盐组:正常盐(0.4%NaCl)饮食;(2)高盐组:高盐(8.0%NaCl)饮食。3 d后麻醉处死动物,留取肾脏组织。采用荧光素酶检测试剂盒测定NF-κB的转录活性并以总蛋白量进行校正。
结果(1)Western印迹结果显示,与正常盐组比较,高盐组C57BL/6j小鼠肾脏髓质COX2蛋白表达显著增加(P<0.05)。(2)NF-κB荧光素酶活性测定结果显示,与正常盐组比较,高盐组HLL小鼠肾脏髓质NF-κB活性表达显著增加(P<0.05)。免疫组化结果显示NF-κB p65亚基表达定位于肾髓质间质细胞。(3)与高盐组比较,硼替佐米+高盐组小鼠肾髓质COX2蛋白表达降低(P<0.05)。(4)与高盐组比较,硼替佐米+高盐组小鼠24 h尿钠排泄量减少(P<0.05),组间尿量的差异无统计学意义。
结论高盐饮食可诱导小鼠肾髓质COX2高表达并激活NF-κB活性,硼替佐米能抑制高盐饮食对肾髓质COX2表达的诱导。NF-κB通路可能参与了高盐饮食调节肾髓质COX表达及尿钠排泄。
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