【摘 要】
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目的 观察饮用水有机提取物染毒对正常人肝细胞(L02)中活性氧(reactive oxygen species,ROS)及细胞凋亡因子表达水平的影响.方法 利用固相萃取法提取饮用水中有机污染物.将L0
【机 构】
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贵州医科大学公共卫生学院贵州医科大学环境污染与疾病监控教育部重点实验室,贵州贵阳550025
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目的 观察饮用水有机提取物染毒对正常人肝细胞(L02)中活性氧(reactive oxygen species,ROS)及细胞凋亡因子表达水平的影响.方法 利用固相萃取法提取饮用水中有机污染物.将L02细胞分别暴露于培养液(空白对照)、0.1％DMSO(溶剂对照)和0.312 5、0.625 0、1.2500、2.500 0、5.0000 L/ml饮用水有机提取物中72 h.采用流式细胞术检测ROS水平,分别采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法和Western blot法检测细胞色素C(cytochrome C,Cyt C)mRNA、蛋白的表达水平,采用酶联免疫吸附试验(Elisa)检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)酶的活力.结果 与溶剂对照组比较,2.500 0、5.000 0 L/ml有机提取物染毒组L02细胞内的ROS水平较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着有机提取物染毒剂量的升高,L02细胞内的ROS水平呈上升趋势.与溶剂对照组比较,1.2500、2.5000、5.0000 L/ml有机提取物染毒组L02细胞内的CytC mRNA和蛋白表达水平均较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着有机提取物染毒剂量的升高,L02细胞内的CytC mRNA和蛋白表达水平均呈上升趋势.与溶剂对照组比较,各剂量有机提取物染毒组L02细胞内的Caspase-9及Caspase-3酶活力均较高,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着有机提取物染毒剂量的升高,L02细胞内的Caspase-9及Caspase-3酶活力均呈上升趋势.结论 饮用水有机提取物可引起L02细胞ROS水平增加,导致Cyt C表达水平上调,进而诱导Caspase-9和Caspase-3酶活力水平升高.氧化损伤调控肝细胞凋亡因子变化可能是饮用水有机提取物致肝细胞损伤的重要环节.
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