猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

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为建立一种快速、特异、鉴别诊断猪伪狂犬病毒野毒感染与疫苗免疫株,参考GenBank上公布的猪伪狂犬病毒gE基因序列设计了1对引物,以猪伪狂犬病毒核酸作为模板,PCR方法将扩增得到的核酸序列克隆到PEGM-18T载体上,将克隆载体转化到DH5α感受态细胞中,测序鉴定阳性重组质粒作为标准品建立猪伪狂犬病毒荧光定量PCR检测方法。结果表明,本研究所建立的猪伪狂犬病毒荧光定量PCR方法检测灵敏度可达10拷贝,与蓝耳病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和可重复性。此外,对33份疑似
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