人白细胞介素21在真核细胞中表达及其体外促T细胞增殖作用

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yczhudong

【摘要】

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目的:构建人细胞因子IL-21表达载体并在Hela细胞中稳定表达,分析rhIL-21体外促T细胞增殖作用.方法:以已构建的pMD-IL21为模板,PCR扩增成熟IL-21 cDNA的编码框序列并构建到真

【作者】

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张胜权陈兵罗欣徐从贞鲁云霞

【机构】

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安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室

【出处】

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中国免疫学杂志

【发表日期】

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2005年1期

【关键词】

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白细胞介素21 克隆表达 T细胞增殖 Interleukin-21(IL-21) Cloning and expression T cells prolifer

【基金项目】

：

安徽省科技基金

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目的:构建人细胞因子IL-21表达载体并在Hela细胞中稳定表达,分析rhIL-21体外促T细胞增殖作用.方法:以已构建的pMD-IL21为模板,PCR扩增成熟IL-21 cDNA的编码框序列并构建到真核表达载体pCDNA3.1/hismyc-B中.挑出阳性克隆进行扩增,脂质体转染入Hela细胞中并以G418加压筛选.有限稀释法、RT-PCR及Western blot筛选出稳定表达的细胞株.培养上清液经金属离子螯合层析分离纯化后,SDS-PAGE、Western blot鉴定.MTT法测定其与抗CD3单克

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